斑马鱼药物筛选和评价

项目介绍：

 

斑马鱼模型由于特殊的生理优势被逐渐应用于药物筛选和安全性评价，与哺乳动物相比，斑马鱼实验成本相对较低，试验周期短（48小时），样品用量少（微克级）、结果观察容易（幼鱼通体透明）、体外发育，繁殖力强，适合于大规模的筛选。同时药物暴露（异种生物、激素、药物以及环境污染物）能够引起斑马鱼出现与哺乳动物类似的生理反应和病理响应。

 

斑马鱼药物筛选和评价的应用方向主要有：

 

ž   筛选和确认毒性部位及成分

ž   确定药物的毒性靶器官及其毒性机制

ž   阐释毒性-代谢关系

ž   潜在药物的毒性筛选和评价

 

 

服务内容

 

ž   药物高通量体内筛选

 

药物库筛选、定制（中药新药、化学小分子、天然产物）

老药新用、药物新特性筛选

 

ž   一站式药效学快速评价

 

肿瘤

抗血管生成药物高通量体内筛选；抗血管生成药物药效学评价

斑马鱼人类癌症移植模型评价抗癌药物药效；抗细胞增殖药物筛选模型；凋亡模型

眼科

眼部血管新生模型（用于老年视黄斑变性、糖尿病视网膜变性等领域）

骨科

骨质疏松模型（用于抗骨质疏松药物评价）

耳鼻喉科科

听细胞（毛细胞）保护剂筛选模型（用于听力保护剂及促听力再生药物开发）

中枢神经

脑细胞凋亡保护剂评价模型（用于急性脑梗塞药物开发）

消化系统

胆管闭锁模型

脂类代谢

磷脂酶 A2 抑制剂筛选模型

皮肤色素

美白护肤产品效枅评价，抗色素药物筛选

组织再生

鳍再生模型

 

ž   药物毒性与安全性评价

 

急性毒性（LC50）

胚胎毒性（OECD 标准）

发育毒性、不致畸性

心血管毒性

肝脏毒性

神经毒性

皮肤和肌肉毒性

听毒性

骨毒性

凋亡

纳米材料毒性

 

 

案例分析

 

应用案例

ž   快速分析药物的胚胎毒性，心脏等靶器官毒性分析

ž   胚胎死亡率-浓度曲线及形态学观察

 






































 

ž   斑马鱼心脏毒性观察

 










 

















 

常见问题


1. 斑马鱼对常见有机溶剂的耐受性

研究表明，斑马鱼胚胎和仔鱼对DMSO、DMF、乙醇、丙酮等的耐受性为0.5-2.5%(孵育时间为24小时)。以DMSO为例。一般在细胞实验中不超过0.1%，而斑马鱼胚胎和仔鱼通常暴露在高达1%的DMSO中。在斑马鱼毒性实验中，胚胎对2.5% DMSO有很好的耐受性。友情提醒，在大多数胚胎孵化中，最终DMSO浓度仍控制在0.1%以下。











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2. 怎么确定半数致死浓度LC50

LC50是指在动物急性毒性实验中，使受试动物半数死亡的毒性浓度。

将供试品设置一系列浓度，并设置一个正常对照组，每组设置3个生物学重复。药物通过溶解到养鱼用水中或灌胃的方式让斑马鱼摄入，进行一定时间的暴露实验。

每天观察记录斑马鱼死亡情况，药物处理结束后，统计各实验组的斑马鱼致死率，使用统计学软件绘制最佳的剂量效应曲线，并计算LC50。


















 

3. 怎么用斑马鱼评价药物的发育毒性与致畸性风险

将受测试斑马鱼胚胎进行分组，其中正常对照组未摄入待测药物或者仅摄入药物溶剂，药物组根据LC50浓度摄入了不同浓度（通常设置3个浓度梯度）的待测药物。

在药物暴露过程中，每天观察记录各个浓度组斑马鱼的死亡情况，并及时挑走死鱼。统计斑马鱼死亡情况并使用软件拟合数据曲线，获得药物的最大非致死浓度（MNLC）和LC10。药物暴露结束后，观察记录斑马鱼身体各个指标的情况并对典型毒性器官进行显微拍照。