细胞基因编辑服务

项目介绍

 

基因编辑是指通过特异性改变目标基因序列以获得期待的生物性状的手段。百维斯生物依托先进的技术和专业的科研团队，根据客户需求和要求帮助客户构建相关载体、检测编辑效率及筛选基因编辑单克隆。在整个项目过程中，百维斯生物专业的项目管理专员，将密切跟踪项目，并阶段性的给客户提供更新、咨询以及售后服务。

 

 

服务内容

 

服务项目

服务内容

CRISPR/Cas9 敲除细胞系构建

CRISPR/Cas9 系统利用 sgRNA/Cas9 复合体识别并在 DNA 特异位点造成双链断裂，利用细胞自身修复机制或者与外源 DNA 同源重组实现基因敲除。

过表达稳转细胞系构建

将目的基因定点整合到基因组的经过筛选的高表达活性位点中，这些位点不仅安全而且基因表达量高，可以实现目的基因过表达，并能长期稳定遗传。实验周期短（3-6 周），整合效率高。对于不同长度的基因的整合，能达到一致整合效率，并可同时整合多个基因。

CRISPR/CasRx 敲降细胞系构建

是指通过降解具有同源序列靶基因的mRNA，达到阻止基因表达的作用。百维斯生物创新的CRISPR/CasRx knockdown 技术，能够识别所有的目标RNA，不需要特异的序列元件，具有操作容易、可以同时靶向多个靶点的优势，可以实现目的基因的敲降研究。

IOS 诱导表达细胞系构建

Tet-Off/Tet-On 系统是比较成熟的真核生物外源基因诱导表达系统之一,具有高效、无毒、开/关较严密等特点，已被成功地应用于细胞和转基因小鼠基因诱导表达的研究。

 

 

技术流程

 




 

 

案例展示

 

CLCA2过表达的抑制子宫颈癌细胞的迁移

 
















 

 





常见问题

 

1.    如何进行细胞RNA 提取？

ž   Trizol 是一种单相溶液，由苯酚和异硫氰酸胍等组成。通过加入Trizol，能破坏细胞和溶解细胞成分，利用氯仿的萃取得到上层水相（含RNA）、界面层和下层的红色有机相（含DNA和蛋白）。得到的水层用异丙醇沉淀并经过酒精的洗涤去除杂质，能分离大小不一的各种RNA。

ž   用途：RT-PCR、分子克隆、Northern-Blot、RNA体外转录与翻译等。

 

2.    什么是细胞转染？

ž   细胞转染是指将外源分子如 DNA、RNA、蛋白质等导入到真核细胞的技术。随着基因和蛋白功能的深入研究，转染已经成为科研实验中最常用的技术手段之一。目前常用的转染方法有阳离子聚合物转染、脂质体转染、电穿孔和病毒感染，不同的转染方法各有利弊，没有一种转染试剂是普遍适用的，我们需要依据自己的实验需求选择合适的转染技术及转染试剂，才有可能得到理想的实验结果。